DNA切除修复蛋白1抗体相关信息

方法
1．Bio-Rad微型凝胶电泳模具的安装
带上手套将凝胶电泳系统的前后玻璃板，梳子用去污剂洗涤，zui后再用去离子水冲洗干净，除去黏附在玻璃板上凝固的胶和其他污垢。晾干玻璃板或用电吹风吹干。将玻璃板的橡胶垫条用吸水纸吸干，然后按Bio-Rad Mini-Protean电泳系统的使用说明书安装好玻璃板，固定于制胶板上。

2．SDS-PAGE凝胶的配制
① 根据实验检测抗原的分子量大小选择合适的电泳分离胶浓度。确定分离胶所需凝胶溶液体积（这些数据一般由厂家提供，例如Bio-Rad Mini-Protean 3 Elecreophoresis Cel 83mm×75mm×0.75mm,两块胶需8ml）
按下表给出数据在一小烧杯中按所需丙烯酰胺浓度配置一定体积的分离胶溶液。依次混合各成分。

10ml分离胶各成分所需体积（ml）
        浓度
溶液成分        8%        12%        15%
水        4.6        3.3        2.3
30%丙烯酰胺        2.7        4.0        5.0
1.5mol/L Tris（pH8.8）        2.5        2.5        2.5
10%SDS        0.1        0.1        0.1
10%过硫酸铵        0.1        0.1        0.1
TEMED        0.006        0.004        0.004
一旦加入TEMED，马上开始聚合，故应立即快速旋动混合物并进入下步操作。
② 迅速在两玻璃板的间隙中灌注丙烯酰胺溶液，不能有气泡，留出灌注积层胶所需空间（梳子的齿长再加1cm）。然后小心的在分离胶溶液上覆盖一层1-5mm的水层，这使凝胶表面变的平整。
③ 等待30-60min，使凝胶聚合。当凝胶聚合后，在分离胶和水层之间会出现一个清晰的界面，可以微微倾斜模具，检测凝胶是否聚合。用去离子水洗涤凝胶顶部数次以除去未聚合的凝胶，尽可能排去凝胶上的液体，再用滤纸吸净残留液体，注意不要接触胶面。
④ 按下法制备积层胶：按下表给出数据在一个干净的试管或小烧杯中制备一定体积浓度为5%的丙烯酰胺溶液，依次混合各成分。（两块5%积层胶Bio-Rad Mini-Protean 83mm×75mm×0.75mm, 两块胶需3ml）
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不同体积积层胶各成分所需体积（ml）
       体积
溶液成分        2        3        5
水        1.4        2.1        3.4
30%丙烯酰胺        0.33        0.5        0.83
1mol/L Tris（pH6.8）        0.25        0.38        0.63
10%SDS        0.02        0.01        0.05
10%过硫酸铵        0.02        0.03        0.05
TEMED        0.002        0.003        0.005
一旦加入TEMED，马上开始聚合，故应立即快速旋动混合物并进入下一步操作。
⑤ 在已聚合的分离胶上直接灌注积层液。立即在积层胶溶液中插入干净的实验预设计的梳子，小心避免混入气泡，将凝胶垂直放置于室温下。
⑥ 积层胶聚合*后（30min）,小心移出梳子，使用洗瓶立即用去离子水洗涤加样槽以除去未聚合的丙烯酰胺。把凝胶固定于电泳装置上，上下槽各加入Tris*电泳缓冲液。