蓝景 如何使用水质微生物检测仪进行水样检测？

　　使用水质微生物检测仪进行水样检测，需严格遵循标准化流程，确保操作的规范性与检测结果的准确性。以下将从检测前准备、样本处理、培养观察到结果计算的全流程进行详细拆解，并补充关键细节与注意事项。
 

　　一、检测前准备：确保物料与设备就绪
 

　　物料准备
 

　　水样采集：使用无菌采样瓶收集水样，确保采样过程避免污染。对于不同类型水样，如饮用水应采集龙头水或管网末梢水；废水需在排放口多点位采样混合。采样后尽快送检，若无法及时检测，需将水样保存在 2-8℃环境中，且保存时间不超过 6 小时。
 

　　定量检测盘选择：根据水样预期微生物浓度选择合适规格，若预估浓度较低(如饮用水、经过处理的中水)，选用 51 孔定量检测盘(检测范围 0 - 200MPN/100ml)；若浓度较高(如未经处理的废水、受污染水源水)，则采用 97 孔定量检测盘(检测范围 0 - 2419.6MPN/100ml)。
 

　　试剂准备：取出酶底物法检测试剂(Minimal Medium ONPG - MUG 培养基)，检查试剂外观是否澄清、有无沉淀或变色，确认在有效期内(通常为 2 年)。试剂使用前需恢复至室温(约 20 - 25℃)，避免因温度差异影响反应。
 

　　定量瓶与耗材：准备洁净的 100mL 定量瓶，确保无残留清洁剂或杂质；同时备好移液器、滴管等辅助工具，并进行灭菌处理(如湿热灭菌 121℃，15 分钟)。
 

　　设备调试
 

　　开启程控定量封口机，进行预热(预热时间≤3 分钟)，检查设备显示屏是否正常显示，设置封口温度(通常默认参数即可，如需调整需参考说明书)，测试封口功能是否正常，确保无漏封、破孔现象。
 

　　准备恒温培养箱，将温度调节至对应检测需求：检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌时设置为 36℃±1℃；检测耐热大肠菌群时设置为 44.5℃，提前 30 分钟开启培养箱，使温度达到稳定状态。
 

　　二、样本处理：规范操作避免误差
 

　　水样与试剂混合：准确量取 100mL 水样倒入定量瓶中(若水样浑浊或杂质较多，需先通过滤纸过滤，但需注意过滤可能影响微生物数量，必要时采用离心处理)，再缓慢加入等量的酶底物法检测试剂，使用振荡器或手动上下颠倒定量瓶 10 - 15 次，使水样与试剂充分混匀。
 

　　分装至定量检测盘：使用移液器或滴管，将混合液均匀分配至定量检测盘的各孔位中，确保每个孔加入的液体量一致(约 1mL / 孔)，避免液体溢出或孔位残留气泡。若孔内存在气泡，可轻拍定量盘侧面使气泡排出，否则可能影响反应和结果观察。
 

　　定量盘封口：将装满样本的定量检测盘平稳放入程控定量封口机的工作区域，启动封口程序。封口机将在 10 - 12 秒内完成密封，取出定量盘时注意避免挤压或碰撞，防止密封膜破损导致样本泄漏或污染。
 

　　三、恒温培养与结果观察：精准把控关键环节
 

　　恒温培养：将封口后的定量检测盘放入预热好的恒温培养箱中，根据检测目标设定培养时间为 24 小时。培养过程中避免频繁开启培养箱，防止温度波动影响微生物生长。若同时培养多个定量盘，需确保盘与盘之间保持适当间距，保证空气流通。
 

　　结果观察：培养结束后，取出定量检测盘，在自然光或白色背景下观察孔位颜色变化，对于疑似大肠埃希氏菌的检测，需使用 366nm 紫外灯照射检测盘，观察是否产生蓝色荧光。记录下呈现黄色的孔位(代表总大肠菌群或耐热大肠菌群阳性)和产生荧光的孔位(代表大肠埃希氏菌阳性)数量。若孔位颜色变化不明显，可将检测盘静置 15 - 30 分钟后再次观察，或与标准比色卡对比确认。
 

　　四、结果计算：依据标准得出准确数据
 

　　根据定量检测盘的阳性孔分布情况，查阅对应的最大可能数(MPN)表(51 孔盘和 97 孔盘对应不同 MPN 表)。例如，若使用 97 孔定量检测盘，检测后发现有 20 个阳性孔，通过查阅 MPN 表，可得出该水样中微生物浓度为 180MPN/100mL 。若检测结果超出定量盘的检测范围，需对水样进行稀释(如 10 倍、100 倍稀释)后重新检测，并根据稀释倍数修正最终结果(计算公式：实际浓度 = 查表 MPN 值 × 稀释倍数)。
 

　　在整个检测过程中，需严格遵守无菌操作规范，避免交叉污染；每次检测建议设置空白对照(使用无菌水替代水样进行同样操作)，以验证检测过程的准确性。若出现异常结果(如空白对照孔位显色、检测结果与预期差异较大)，需检查试剂有效性、操作步骤是否规范，必要时重新检测，确保出具的数据真实可靠。