ELISA试剂盒检测中用到的样品处理方法

　　hbzhan内容导读：试剂盒使用时一定要根据自己的实验需要购买提取试剂盒，如果不是试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性，会影响RT-PCR、Northernblot、Dotblot、RealtimeRTPCR、芯片分析、polyA筛选、体外翻译、RNase保护分析、分子克隆等后续实验的结果。
　　
　　1.细胞培养物上清：
　　
　　细胞培养物于室温1000g，离心10分钟后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。
　　
　　2.血清：
　　
　　标本请于室温放置2小时或4℃过夜后与1000g，4℃离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
　　
　　3.血浆：
　　
　　可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃，1000g离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
　　
　　4.尿液：
　　
　　无菌收集取初尿，离心除去沉淀物，既可用于检测，要长期保存尿样，可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存，或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。
　　
　　5.组织匀浆：
　　
　　将组织标本先用PBS洗涤，除去多余血液，匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜，再经过二次反复冻融破膜，5000g,4℃离心5分钟，取上清即可检测。
　　
　　当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒，但其售价较高，单次实验费用话费太大，对精度要求不高的实验没有必要购买，当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题（如果碰上国内无货的时候，要从国外发货，会等很长一段时间）。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以，价格不高，基本上各地均有现货，如天根（目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种）等，其价格比进口试剂盒要便宜许多，且效果还不错，性价比还可以。
　　
　　当然，就RNA的提取而言，不一定试剂盒的提取效果就非常好，其实采用一些经典的RNA提取方法，效果也很不错，如：TRIZOL、EDTA等，只是试剂盒使用方便，经典的方法操作复杂一些。