液相色谱法测定蔬菜中3种有机磷农药残留量

按1．4节方法处置样品后按上述色谱条件进行测定。得到样品色谱图如图所示。甲基对硫磷、乙基对硫磷、甲拌磷的残留量分别为1.752.131.83mg/kg白菜中加入上述3种农药作为模拟蔬菜样品。

主要应用于粮食、蔬菜和水果上。虽然有机磷农药属非耐久性农药， 有机磷农药是目前我国使用量较大的杀虫剂之一。但其大量使用肯定会对环境发生负面影响，对人、蓄构成严重威胁．临时食用受污染的粮食、蔬菜，导致癌症、动脉硬化、心血管病、胎儿畸形、死胎、早天、早衰等疾病的重要原因；绝大多数人食用有害蔬菜后并不马上表示出症状，但毒物在人体中富集，时间长了便会酿成严重后果。国近年来发生的农药中毒事故大多数集中于高毒有机磷农药，以对硫磷zui多，局部地区占80％左右。因此，建立有效的检测农副产品中有机磷农药残留量的方法具有重要意义。有机磷农药的测定常采用气相色谱法，可是大部分有机磷农药具有很强的极性和热不稳定性，给气相色谱分析带来一定的难度。本研究采用液相色谱法同时测定蔬菜中甲基对硫磷、乙基对硫磷和甲拌磷。

1实验局部

1．1仪器与试剂

LC-1OA 高压溶液输送泵和N2000色谱工作站（浙江大学智能信息工程研究所）BF2000氮气吹干仪（北京八方世纪科技有限公司）FS-1电动匀浆机（金坛市富华仪器有限公司）．试剂．甲基对硫磷标准品（99.0％，仪器．LC-1OAT液相色谱仪（日本岛津公司）包括：SPD-10AVP10APVP紫外-可见检测器。国家农药质检中心（沈阳）乙基对硫磷标准品（99.0％，天津农药质检中心）甲拌磷标准品（98.0％，天津农药质检中心）甲醇（色谱纯，北京化工厂）乙腈（色谱纯，天津市博迪化工有限公司）实验用水为重蒸馏水。

1．2色谱条件

液相色谱柱为Shim-PackVP-ODS150L4．6流动相为V甲醇：V水=8515流速为1.0mLmin．进样量20uL以峰面积外标法定量。

1．3规范溶液的配制

用甲醇制成一定浓度的贮藏液，准确称取一定量的农药规范品。再逐级稀释贮藏液，得质量浓度分别为0.100.501.01.52.0mgL规范混合液。

1．4样品处置方法

取可食部分，取1000g白菜。用干净的纱布擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎．准确称取3份25g试样，分别加入50.0mL乙腈，匀浆机中匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5g氯化钠的100mL具塞量筒中，盖上塞子，剧烈震荡1min静至10min使乙腈与水相分层．将含乙腈的有机层经盛有3g*的漏斗过滤于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，从中吸取10mL溶液，再用氮吹仪吹至近干后用甲醇溶解定容至5mL经0.45&mum滤膜过滤后进样。

2结果与讨论

2．1测定波长的选择

测得3种农药的zui大吸收波长分别为甲基对硫磷265nm乙基对硫磷259nm甲拌磷为238nm．综合考虑3种组分的zui大吸收值及灵敏度，分别将3种农药的规范贮藏液依次用UV一1100紫外／可见分光光度计进行波长扫描。zui终选择紫外检测波长为250nm

2．2流动相组成对分离度的影响

随着甲醇含量的增加，实验考察了甲醇-水的不同比例对甲基对硫磷、乙基对硫磷、甲拌磷分离的影响。实验结果标明。其分离度逐渐减小，当甲醇：水=8515时，各组分仍能够得到很好的分离，且分析所用的时间较短。

2．3工作曲线和检出限

优化的色谱条件下进行分析，取1．3节的规范溶液。得到规范色谱图。同一样品平行测定5次，取其平均值，绘制工作曲线，以峰面积A对浓度cmgL回归计算，结果标明线性关系良好，回归方程、相关系数和检测限。

2．4精密度实验

上述色谱条件下，取质量浓度为1.5mgL混合规范品。连续进行7次测定，经计算得到测定甲基对硫磷、乙基对硫磷、甲拌磷的精密度RSD分别为4.6％、3.2％、2.9％。

2．5回收率测定

按&ldquo1．4&rdquo节方法制备样品液进行测定，已知含量的白菜样品中分别加入不同浓度的有机磷农药规范品。扣除样品中原有的农药含量，求出加标回收率，结果可知，甲基对硫磷回收率为95.44％～98.33％；乙基对硫磷回收率为93.33％～101.67％；甲拌磷回收率为94.00％～97.78％。

2．6样品分析