抗 原 修 复（免疫组化石蜡切片）

抗 原 修 复（免疫组化石蜡切片）

用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片需要抗原修复：
    福尔马林固定的组织有可能破坏了原来组织的抗原结构，蛋白多肽发生交联，导致部分抗原表位封闭，结合位点减少，所以需要抗原修复，以暴露原来的抗原表位，达到充分显露抗原，以不出现明显脱片现象为佳。
              抗原修复的几种常用方法：（供参考）
    1. 微波炉加热：在微波炉里加热0.01*缓冲液（pH6.0）至沸腾后将组织芯片放入，断电，间隔5-10分钟，反复1-2次。
适用的抗原：来源于人、大鼠、小鼠的组织标本；来源于其他动物种属的组织标本：
Bcl-2.Bax.AR.PR.C-fos.x-jum.z-kit.c-myc.E-cadherin.
ChromograninA.Cyclin.ER.Heatshock.Protein.HPV.Ki-67.MDMZ.P53.P34.P15.P-glycoprotein.PKC.PCNA.ras.Rb.等
    2. 高压热修复：在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01m*缓冲溶液（pH6.0）.盖上不锈钢锅盖，但不能锁定。将玻片置于金属染色架上，缓慢加压，使玻片在缓冲液中浸泡五分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。10分钟后除去热源，置入凉水中，当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。（骨及软骨组织的标本选择较温和的微波加热修复）
    3. 沸热修复： 电炉或水浴锅加热0.01M*缓冲液（pH6.0）至95℃左右，放入组织芯片加热10-15分钟。
    4. 酶消化方法：
    常用0.1%*和0.4%*液。*使用前预热37℃，消化时间约为5-30分钟。适用于被固定遮蔽的抗原：包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等

          上海瑞齐生物技术有限公司 免疫学实验室