磺胺甲氧嘧啶和*残留检验的气相色谱测定方法

（1）试剂和材料
①乙腈：分析纯，重蒸馏，收集81—82℃馏分。
②正己烷：分析纯，重蒸馏，收集67—69℃馏分。
③乙酸乙酯：分析纯，重蒸馏，收集76～阳℃馏分
④丙酮：分析纯。
⑤乙醚：分析纯，重蒸馏。收集33～34℃馏分，
⑥磷酸二氢钾溶液：1mo1／l，
⑦*：分析纯，经650℃灼烧4L。置于密封容器内备用。
⑧氯化钠：优级纯。
⑨重氮甲烷—乙醚溶液：将装有氢氧化钾水溶液（6g／10ml、35ml乙醇（分析纯）及10m1乙醚的混合液的烧瓶置于70℃水浴上，边用磁力搅拌器搅拌边通过漏斗滴下N—甲基—N—亚硝基—对甲苯磺酰胺（分析纯）的乙醚溶液（21.5g／140m1），进行蒸馏。接收器为置于冰浴中的两个100m1烧瓶。于第2个烧瓶中加入乙醚10m1，以捕集从第1个烧瓶中逸出的气体重氮甲烷于乙醚中。蒸馏结束后将蒸馏液合并，在70℃水浴上再重新蒸馏1次，蒸馏液即为重氮甲烷—乙醚溶液。此液密闭置于冰箱中，可保持1个月稳定。
注意：重氮甲烷有毒，可引起特异性过敏，而且易引起爆炸，配制重氮甲烷试剂、甲酯化或蒸发应在
通风橱中进行。重氮甲烷溶液应贮于冷冻器内，不要暴露于直射阳光或强烈的人工光下。
⑩磺胺甲氧嘧啶标准晶：纯度≥99％。
⑩*标准品；纯度≥99％。
⑩标准溶液：o．1mg／ml。分别准确称取10．0mg的磺胺甲氧嘧啶和磺胺喹嗯啉标准品，用约10m1乙腈溶解并用乙腈准确定容至100mi，摇匀，为标准贮备液。根据需要再配制成适用浓度的混合标准工作溶液。
（2）测定步骤
①提取 取经绞碎混匀的试样约10g（到o．01g）于100mI具塞锥形瓶中，加入20m1乙腈，于振荡器上提取30rain。用中速定量滤纸将乙腈提取液过滤于250ml蒸发瓶中，并用30ml乙腈分3次洗涤残渣。然后在35~C水浴中用旋转蒸发器浓缩至近干，加入3ml盐酸溶液（6mol／L）浸出。
②净化 于上述盐酸溶液中加入20mi乙醚—正己烷（1十1）混合液，振摇lmin，静置10min。用抽吸管将上层有机层缓慢抽出并弃去之。再如上重复净化两次。用两份5m1磷酸二氢钾溶液（1mol／L）将酸相转移至125m1分液漏斗中，用氢氧化钠溶液（6m01／L）调节pH值至8．o～8．5。加入10g氯化钠，用20ml乙酸乙酯振摇提取3次。合并乙酸乙酯提取液，经*脱水后，收集于100ml蒸发瓶中，然后在35℃水浴中用旋转蒸发器蒸发
③甲酯化 加入lml丙酮以溶解残渣，再加入2ml重氮甲烷—乙醚溶液。加塞，室温下避光放置30min，其间进行断续轻摇。反应结束后，减压浓缩至干。准确加人1．00ml乙酸乙酯—正己烷混合液（3+7）以溶解残渣，溶液供测定。
④标准品甲酯化 取适量磺胺标准工作溶液于具塞试管中，用氮气吹去溶剂，lml丙酮以溶解残渣，加入2ml重氮甲烷—乙醚溶液。加塞，室温下避光放置30min，进行断续轻摇。反应结束后再用氮气吹干,准确加入L 00ml乙酸乙酯—正己烷混合液（3+7）以溶解残渣，溶液供测定。
⑤测定
a．色谱条件
色谱柱：30mX0．53mm（内径）X1，0um膜厚 熔融石英毛细管柱
色谱柱温度：245C（8min）—280C1 30min）
进样口温度：280C
检测器温度：300C
载气、尾吹气：氮气，纯度≥99．99％柱流量7ml／iTllB；尾吹气流量50ml／min
进样方式：柱头进样，五分流
b．色谱测定 分别准确注入斗L经甲酯化后的标准工作溶液及适用浓度的样品溶液于气相色谱仪中，按上述色谱条件进行色谱分析。响应值均应在仪器检测的线性范围之内。磺胺甲氧嘧啶甲酯的保留时间约为13min，磺胺喹噫啉甲酯的保留时间约为26m[n。
⑥空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。
（3）灵敏度和回收率
本方法的测定低限：磺胺甲氧嘧啶为5ug／ks，磺胺喹嗯啉为10ug／kg。
磺胺甲氧嘧啶添加浓度在0．005～0．050mg／kz范围内，回收率为75％一98％；*添加浓度在o．010～0．100mg儿s范围内，回收率为79％～105％。