免疫金细胞化学方法

Geoghegan等于1978年应用免疫金探针检测B淋巴细胞表面抗原建立了免疫金法（1GS）。IGS的特点是染色程序简便，不需要显色，既能检测细胞表面的抗原，又能检测细胞内抗原。
下面以人肝组织HBsAg的定位检测为例说明间接免疫金法的步骤。
（1）石蜡切片一脱蜡复水至PBS。
（2）0．1％*消化切片10rain或3mol／L尿素消化30rain。
（3）用蒸馏水振洗5minX2。
（4）用0．02mol／L TBS（pH8：2）振洗10rainX2。
（5）1％卵蛋白（EA）封闭10min。
（6）稀释鼠抗HBsAg单克隆抗体[用0．02mol／1 TBS（pH8．2），作1：100稀释]，4℃环境下过夜。
（7）0．02mol／L TBS（pH8．2）振洗10rainX2。
（8）1％EA封闭10min。
（9）0．02mol／L TBS（pH8．2）稀释兔抗鼠金标抗体（1：8）37℃45min。
（10）0．02mol／I TBS（pH8．2）振洗10rainX2。
（11）蒸馏水振洗5minX2。
（12）1％戊二醛，作用10min。
（13）蒸馏水浸泡5min。
（14）用苏木素衬染核lmin，甘油封片。
结果：在光学显微镜下可见部分肝细胞浆内有金颗粒聚集呈红色，沿细胞膜分布，表明有HBsAg定位在细胞浆内。