流式细胞仪的主要技术指标及应用范围

（一）荧光测量灵敏度
灵敏度的高低是衡量仪器检测微弱荧光信号的重要指标，一般以能检测到单个微球上zui少标有异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）或藻红蛋白（phyloerythrin，PE）荧光分子数目来表示，现在的FCM均可达到600个荧光分子。

（二）分辨率
分辨率的高低是衡量仪器检测量精度的指标，通常用变异系数（CV）值来表示：
CV＝D／M×l00％（其中D是分布的标准差，M是分布的平均值）
如果一群含量*相等的样本用FCM来测量，理想的情况下，CV为0；用FCM测量曲线表示为垂直于横轴的直线。但是在整个系统检测中会带人许多误差，其中样本含量本身的误差、样本在流进照射光区域的微量变化、再加上仪器本身的误差等，实际得到的是一呈正态分布的曲线，CV值越小则曲线分布越窄越集中，测量误差就越小，一般的FCM在*状态时CV值均<2％。CV值除了采用以上的计算公式外，还可用半高峰宽来计算，半高峰宽指在峰高一半的地方量得的峰宽，它与CV值有以下的关系：
CV＝半高峰宽／M×0．4236X100％
上述公式建立在正态分布的条件下，而实际数据分布常常是非对称图形，故采用半高峰宽所计算得到的CV值要明显小于统计公式得到的CV值，在实际应用中应引起注
意。

（三）前向角散射光检测灵敏度
灵敏度是指能够检测到的zui小颗粒大小，目前FCM可以测量到0．2—0．5mm。

（四）FCM的分析速度
分析速度是以每秒可分析的细胞数来表示，当细胞流过光束的速度超过FCM仪器响应速度时，细胞产生的荧光信号就会被丢失，这段时间称为仪器的死时间。死时间越短，则仪器的处理速度越快，一般可达3 000～6 000／s，大型机已达到每秒几万个细胞。

（五）FCM分选指标
分选指标包括分选速度、分选纯度及分选收获率。分选速度指每秒可提取的细胞数。目前台式带分选仪器的分选速度约为300／s；大型机约为每秒上万个。分选纯度指被分选出细胞所占的百分比，目前大型机与小型机分选纯度均可达到99％。分选收获率指被分选出的细胞与原来溶液中该细胞的百分比。通常情况下，分选纯度和收获率是互相矛盾的，纯度高，收获率下降，反之亦然。这是由于样本在流液中并不是等距离一个接一个有序地排列，而是随机的。一旦两个不同细胞相距得很近时，在强调纯度和收获率不同条件下，仪器会作出取舍的决定。因此，选择不同模式要视具体实验要求而定。

流式细胞仪的应用范围 自20世纪70年代以来，随着流式细胞技术水平的不断提高，其应用范围也日益广泛。流式细胞术已普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学研究领域。

目前国内外FCM在医学临床及科研中的应用主要有以下几方面：①监测细胞免疫状态；②组织配型与监控移植的排斥反应；③白血病的诊断及疗效观察；④遗传性血小板疾病的诊断；⑤细胞DNA定量及细胞周期的分析；⑥细胞凋亡的检测；⑦细胞特异性标志物的测定；⑧细菌的鉴定。