上海恒远生物科技有限公司作者
*说明书
50T
一、原理:
在酸性溶液和还原剂的作用下,使运铁蛋白中铁与蛋白分离,使血清中的高铁还原成亚铁,后者与双吡啶结合成粉红色的络合物,在一定范围内,铁离子的多少与色泽成正比。
二、试剂的组成与配制:
1、100mg/L铁标准贮备液:1ml 溶液一瓶,4℃保存3个月。
2mg/L铁标准应用液的配制:取铁标准贮备液0.2ml加蒸馏水定溶至10ml, 4℃保存。
2、铁显色剂:2号甲粉剂一支,2号乙粉剂一支,二号丙液100ml×1瓶,4℃保存6个月。
用时将甲、乙二粉剂倒入丙液中,充分混匀,溶解,即为铁显色剂,4℃避光保存。
三、操作表:
| 空白管O | 标准管S | 测定管U |
蒸馏水(ml) | 0.5 | | |
2mg/L铁标准应用液(ml) | | 0.5 | |
血清 (ml) | | | 0.5 |
铁显色剂(ml) | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
混匀后,沸水浴5分钟,(空白及标准管可以不煮),冷却后离心,3500转/分,离心10分钟,取上清液1.0ml,0.5cm光径,波长520nm,双蒸水调零,测各管吸光度OD值。
四、计算与举例:
四、计算与举例:
1、 计算公式:
血清铁(mg/L)=×标准浓度(2mg/L)
血清铁(umol/L)=×标准浓度(35.81umol/L)
*标准管铁含量为2000ug/L,铁原子量为55.847,所以标准管铁含量为35.81umol/L
2、举例:
取血浆0.5ml按操作表进行血清(浆)铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测定各管吸光度为:空白管0.000,标准管0.038,测定管0.037,则计算如下:
血清铁(umol/L)=×标准液浓度=×35.81=34.87(umol/L)
五、注意点:
1、 玻璃器材需严格清洗,避免铁的污染,建议用一次性塑料试管。
2、 若上清浑浊,可再用另一试管再次离心后比色。
上海恒远生物公司专业经销众多生命科学领域的ELISA试剂盒,生物试剂,抗体,培养基,血清。为中国科研试剂供应商之一,质量被全国各大院校科研机构认可,并为Elisa试剂盒长期供应商,作为战略合作伙伴。欢迎您。
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