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广东省华微检测股份有限公司作者
病毒灭活能力试验是一种十分重要的试验过程，做病毒的杀灭效果试验检测，首先需要根据具体的产品具体的病毒灭活分析，病毒灭活效果验证，要找可靠具备CMA资质认证的病毒杀灭试验检测中心机构。--广东省华微检测股份有限公司。
病毒灭活能力试验的病毒悬液制备方法？
1、从液氮中取出冷冻的测试宿主细胞，在37°C的温水中迅速融化，并使用毛细管吸管将其移植到细胞中含维护溶液的细胞管中，移液几次以混合，立即离心（3000r/min，3min），并除去上清液。然后添加适当的细胞维持溶液，移液几次以混合，然后如上所述离心后，转移到含有10种培养基的培养瓶中。每天观察细胞生长，并在单层细胞过度生长时将其用于消毒测试。
2、取出冷冻保存的测试病毒种类，在37°C水浴中融化，用细胞维持液稀释10倍，然后接种到已生长有单层细胞的细胞瓶中，将其置于37°C的培养箱中，使其吸附并与细胞一起生长。每天观察病变，并在3/4个细胞病变时收获病毒。
3、用声波（或反复冷冻和融化）破坏含病毒的培养基中的宿主细胞，并在冰浴中破坏宿主细胞以释放病毒。然后，尽快离心（6000r/min，15min）以除去沉淀物（主要是细胞碎片），上清液即为所需的病毒悬液。每管装1.0份等分试样到无菌离心管（1.5）中。
4、取病毒悬液，并根据病毒滴度确定方法确定病毒滴度。将其余的冷冻并储存在-80℃下以备后用。
病毒灭活能力试验的三种原理：
1、包膜的破坏：包膜中含有脂质，因此包膜的病毒可以被脂质溶剂快速破坏，例如氯仿或脱氧胆酸钠可以使它失活病毒。实际上，病毒对脂质溶剂的敏感性可用于检查病毒是否具有包膜。诸如渗透压变化，冻结和解冻，热量和干燥之类的物理因素可能会损坏外壳。一般认为，呼吸道感染病毒对干燥的抵抗力较弱，并且传播主要是直接的人感染，这是由于包膜引起的。
2、病毒蛋白质变性：可使蛋白质变性的化学试剂可以使病毒失活，例如酚，次氯酸盐，酸和碱等。。加热引起的变性也是一种有效的灭活方法。一般而言，该病毒对热的抵抗力较弱，并且在60°C的几分钟内，该病毒的传染性显着降低。因此，当分离出病毒时，从患者身上采集的标本需要在低温下保存，并迅速送到实验室，并在-80下保存以进行长期保存。低于°C的低温条件。
3、病毒核酸损伤：诸如y射线之类的电离辐射会切断核酸，紫外线会导致核苷酸链上相邻的嘧啶碱基形成二聚体，从而破坏病毒基因的功能。另外，染料如as啶橙或中性红可以与病毒核酸结合，暴露于光下可以分解核酸并使灭活的浆果失活。
关键词：培养箱
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