GE-200液相色谱仪在饲料中*的含量测定应用

2012年03月30日 14:10:03人气：1362来源：赛尔泰科技有限公司

GE-200液相色谱仪在饲料中*的含量测定应用

本标准适用于混合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中*的测定。本标准测定量限（LOQ）为每千克饲料中*2mg。

GB/T 6682 分析实验用水规则和实验方法

仪器设备

GE-200二元高压液相色谱仪，配梯度洗脱SCL-501系统控制器，GE-200液相色谱仪，N2010色谱工作站

色谱柱：Vertex 苯基柱4.6*250,5um

分析天平：感量0.0001g

天平：感量0.01g

振荡器

玻璃具塞三角瓶：250ml

微孔滤膜：孔径0.45um

试剂和溶液

水应符合GB/T 6682三级水的规定

乙腈：色谱纯，磷酸：85%，二丁胺，磷酸二氢钾，*

1mol/L磷酸二丁胺缓冲液（DBAP）：在700ml水中加入168ml二丁胺，然后缓慢加入约70ml磷酸，震荡使二丁胺溶解，冷却至室温。调节PH至2.5-5.6（以每次1-2ml的速度加入18ml磷酸）。转移至量瓶中，加水至1000Ml,过滤，备用。

PH6.0磷酸缓冲液：取136g磷酸二氢钾、69g*至900ml水中，用磷酸调节PH至6.0±0.2，转移至量瓶中，加水至1000ml

提取液：取200ml乙腈、25mlDBAP,25ml磷酸缓冲液，加水至1000ml

流动相A：乙腈

流动相B：PH2.4-3.0的水（用磷酸调节、过滤）

流动相C：0.02ml/L DBAP溶液。取20ml 1mol/L DBAP溶液，加水至1000ml，过滤即得

*标准溶液：将*对照品在在60℃减压干燥3H，称取400mg（到0.0001g），置于100mL棕色容量瓶中，用乙腈溶液、定容，配置成4000ug/ml的贮备液，避光保存。

*标准中间液：准确吸取6.25ml标准贮备液于50ml棕色容量瓶中，用提取液稀释、定容、赔偿成浓度500ug/ml的标准中间液。

*标准工作液：准确吸取一定量的标准中间液于棕色容量瓶中，用提取液稀释、定容至浓度为5、20、40、60、80ug/ml的标准工作液

试样制备

取有代表性的样品至少500g，用四分法缩减至约200g，粉碎通过1mm孔径筛，混匀，贮于磨口瓶中备用

分析步奏

称取试样2g-10g（至0.01g）于玻璃具塞三角瓶中，准确加入100ml提取液，振荡器上震荡60Min（震荡速度200r/min）。用滤纸过滤，弃初滤液，收集部分滤液，用微孔滤膜过滤，滤液供液相色谱分析。

HPLC色谱条件

色谱柱：Vertex 苯基柱4.6*250,5um

检测波长：280nm

流动相流速：1.5ml/min

进样体积：20uL

流动相：A、B、C，梯度见下表：

时间（min） A% B% C%

0.0 50 50 0

3.0 50 50 0

4.0 15 85 0

5.0 15 0 85

25.0 25 0 75

25.1 50 50 0

30.0 50 50 0

定量测定

测定标准工作液和试样溶液中*峰面积的响应值，用单点或多点校准法定量

关键词：液相色谱仪色谱仪控制器色谱柱分析天平

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