尿素氮（BUN）试剂盒说明书

【资料简介】

尿素氮（BUN）试剂盒说明书 
                                                           分光光度法 50 管/48样 
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 
测定意义 
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功
能的主要指标之一。 
测定原理 
在碱性条件下，尿酶水解尿素产生氨，氨与次氯酸反应生成氯胺，再与酚衍生物作用生成绿
色吲哚酚，在 630nm处有特征吸收峰。 
尿素氮（BUN）试剂盒说明书 自备实验用品及仪器 
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。 
试剂组成和配制         
标准品：液体 1mL× 1 支，4℃保存。 
试剂一：粉剂× 1 瓶，4℃避光保存，临用前加 10mL 蒸馏水充分溶解。 
试剂二：液体 20mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
试剂三：液体 20mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
样品处理 
1.  组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入1mL
蒸馏水）加入蒸馏水，匀浆后于 25℃，10000g 离心 10min，取上清待测。 
2.  细胞：按照细胞数量（104
个）：蒸馏水体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500
万细胞加入 1mL 蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，
总时间 3min） ；然后 4℃，10000g 离心10min，取上清置于冰上待测。 
3.  血清或其它液体：直接检测。                                             
尿素氮（BUN）试剂盒说明书 测定操作 
  空白管  标准管  测定管 
样品（μL）      100 
标准品（μL）    100   
H2O（μL）  100     
试剂一（μL）  200  200  200 
充分混匀，于 37℃反应10min 
试剂二（μL）  350  350  350 
试剂三（μL）  350  350  350 
充分混匀，于 37℃显色10min，于 1mL 玻璃比色皿，双蒸水调零，测定 630nm处吸光值，
记为 A 空白管、A标准管和 A测定管 
注意：空白管和标准管只需测定一次。 
 计算公式 
1.  按样本质量计算 
尿素氮含量（mg/g  鲜重）=
空白管 标准管
空白管 测定管
A - A
A - A
×C 标准品÷W 
= 0.005×
空白管 标准管
空白管 测定管
A - A
A - A
÷W 
2.  按细胞数量计算
尿素氮含量（mg/104
 cell）=
空白管 标准管
空白管 测定管
A - A
A - A
×C 标准品÷细胞数量 
= 0.005×
空白管 标准管
空白管 测定管
A - A
A - A
÷细胞数量 
3.  按液体体积计算 
尿素氮含量（mg/L）=
空白管 标准管
空白管 测定管
A - A
A - A
×C 标准品 
=5×
空白管 标准管
空白管 测定管
A - A
A - A
 
C 标准品：标准品浓度，5mg/L；W：样品质量，g 
 
 注意事项 
1.  配制好的试剂一在 2-8℃条件下可保存一周。 
2.  zui低检出限为 80μ g/L。