牛免疫球蛋白G（IgG） ELISA试剂盒说明书

【资料简介】

牛免疫球蛋白G(IgG) ELISA试剂盒仅供研究使用

目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中免疫球蛋白 G(IgG)的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛免疫球蛋白 G(IgG)水平。用纯化的 IgG 抗体包被
微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白 G(IgG)，再与 HRP 标记
的 IgG 抗体结合， 形成抗体-抗原-酶标抗体复合物， 经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB
在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中
的免疫球蛋白 G 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值） ，通过标准曲线
计算样品中牛免疫球蛋白 G(IgG)浓度。

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分） 。仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心
20 分钟左右（2000-3000 转/分） 。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次
离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分） 。仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/
分） 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞
浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分
钟左右（2000-3000 转/分） 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
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5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分） 。仔细收集上清。分装后一份待
检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性

详细说明书见附件！