500 毫摩尔超氧阴离子清除剂TEMPOL 溶液产品说明书

【资料简介】

500 毫摩尔超氧阴离子清除剂TEMPOL 溶液产品说明书（中文版）
主要用途
500 毫摩尔超氧阴离子清除剂TEMPOL 溶液是一种旨在模拟超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基阴离
子的辅助试剂。其适用于氧化应急活性氧等研究。其适用于各种细胞培养、动物实验中超氧自由基阴离子
的清除。产品即到即用，严格无菌，性能稳定，高纯活性。
技术背景
4-羟基-2,2,6,6,-四甲基哌啶氧（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy；TEMPO）是一种自旋标记（spin
label）的水溶性稳定哌啶氮氧化合物（piperidine nitroxide），分子式是C9H18NO2，分子量为172.24。其主
要作用在于自由通过质膜，具有超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基阴离子，起到活性氧的解毒作用，
同时具有神经保护、抗炎和镇痛作用。
产品内容
清除剂（Reagent A） 毫升
产品说明书1 份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保证6 月
用户自备
*细胞培养液：用于支持细胞生长的营养液
细胞培养板（瓶）：用于细胞培养的容器
盖玻片：用于细胞生长的载体
台式离心机：用于悬浮细胞的收集
细胞培养箱：用于细胞孵育
15 毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
实验提示
实验开始前，将－20℃冰箱里的清除剂（Reagent A）置于冰槽里融化。然后进行下列操作：
方法一：贴壁细胞处理
1． 在6 孔细胞培养板里的1 孔放置盖玻片
2． 加入2 毫升用户自备的*细胞培养液
3． 加入1 毫升待测细胞（1 至5 X 105 细胞）
4． 轻轻摇动，使细胞均匀分布
5． 放进37℃细胞培养箱孵育，直至细胞生长到50％铺满率
6． 小心抽掉细胞培养液
7． 加入3 毫升新鲜的用户自备的*细胞培养液
8． 加入xx 微升清除剂（Reagent A）
9． 轻轻摇动培养板，混匀
10．放进37℃细胞培养箱孵育24 小时
11．小心抽掉含有清除剂（Reagent A）的细胞培养液
12．继续后续操作
方法二：悬浮细胞处理
1． 准备1 个25cm2 细胞培养瓶
2． 加入2 毫升用户自备的*细胞培养液
3． 加入1 毫升待测细胞（5 X 105 细胞）
4． 轻轻摇动，使细胞均匀分布
5． 放进37℃细胞培养箱孵育24 小时
6． 小心移出细胞培养液到15 毫升锥形离心管
7． 放进台式离心机离心10 分钟，速度为300g
8． 小心抽掉上清液
9． 加入3 毫升新鲜的*细胞培养液，混匀细胞颗粒群
10．加入xx 微升清除剂（Reagent A）
11．轻轻摇动离心管，混匀
12．放进37℃细胞培养箱孵育24 小时
13．放进台式离心机离心10 分钟，速度为300g
14．小心抽掉含有清除剂（Reagent A）的细胞培养液
15．继续后续操作
方法三：动物实验
1． 准备1 个待测的实验动物
2． 静脉注射xx 微升清除剂（Reagent A）/100 克动物体重
3． 或腹腔注射xx 微升清除剂（Reagent A）/100 克动物体重
4． 或输液/灌注xx 至xx 微升清除剂（Reagent A）/100 克动物体重
5． 注射后30 分钟至4 小时继续后续麻醉、断颈椎、解剖、组织制片等操作
注意事项
1． 本产品为1 毫升规格（100 倍浓度）
2． 本产品即到即用，无需进行任何处理
3． 使用时，戴好手套
4． 避免反复冻融
5． 使用时，避免污染母液
6． 细胞孵育时间可以根据用户的具体情况调整，通常为6 小时至24 小时
7． 动物实验可以每天注射，持续1 周，然后观察分析
8． 本公司提供系列活性氧清除试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定严格无菌