2011 09-08

生物图像处理的基本术语和常用参数

一.像素与灰度1．像素是构成显示器图像的zui基本单元，按行和列（X和Y）方向排列成矩列。任何一矩列均对应一个点，这些点称为像素。单位面积屏幕上像素愈多则图像愈清晰，即分辨率愈高，显示的图像也越细腻和...

2011 09-05

原位杂交结合免疫组织化学技术

原位杂交结合免疫组织化学技术主要用于在同一细胞内同时或先后检测特定基因在核酸和蛋白质或多肽水平的表达，这样不仅能了解基因表达，而且还能研究某种基因表达的翻译和转录调节。如果免疫组织化学检测的抗原成分是...

2011 08-31

自动化的ELISA技术

在一般的概念里，ELISA技术的可操作性强，不需复杂设备，甚至*手工加样、洗板和肉眼判读结果，便可完成该技术的操作。随着人们对质量控制意识的加强，尽可能做到zui低限度的减少系统误差，以及减少劳动强度...

2011 08-29

125I标记物的鉴定方法

1．放射化学纯度是指单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率，一般要求大于95%。常用的测定方法是利用三氯醋酸将待测样品中（预加白蛋白助沉淀）所有蛋白质沉淀，离心后测定沉淀物（标记物）的...

2011 08-24

外源凝集素技术

外源凝集素（lectin）又称植物凝集素、凝集素或选择素，是广泛存在于动植物细胞内的一种糖蛋白成分，是机体中除抗体和酶之外的第三类具有识别作用的蛋白质，它可与某一特定细菌发生特异性结合，从而对细菌具有...

2011 08-22

化学试剂的等级

根据化学试剂的纯度，按杂质含量的多少可分为四级：一级试剂为纯试剂，通常用G·R表示；二级试剂为分析纯试剂，通常用A·R表示；三级试剂为化学纯试剂，通常用C·R表示；四级试剂为实验或工业试剂，通常用L·...

2011 08-17

Western Blot

【实验原理】一个基因表达*结果是产生相应的蛋白质（或酶）。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“...

2011 08-15

电子显微镜待检样品的制备

一、电子显微镜与光学显微镜的主要区别显微镜的分辨率取决于所用光的波长，1933年开始出现的电子显微镜正是由于使用了波长比可见光短得多的电子束作为光源，使其所能达到的分辨率较光学显微镜大大提高。而光源的...

2011 08-05

怎么获得染料法荧光PCR的可靠数据

染料法荧光PCR的数据与探针法的相比，除了扩增曲线之外，还增加了熔解曲线分析。如何确定数据是好是坏？好的话，数据可以使用；坏的话，需要查明原因，拟定下一步的体系优化方案。这里探讨如何确定数据是好是坏，...

2011 08-02

初步分析IHC实验结果不好的原因

当拿到一种商品化抗体，或自己制备的一抗或赠送的一抗，一般可根据如下原则处理：①、寻找信息；②、如无任何信息，可先不经任何前处理用于IHC检测；③、如未经处理的染色结果呈阴性或不理想阳性结果，可用酶消化...

2011 07-28

化学合成Oligo知识

Oligo在分子生物学研究、临床诊断和药物治疗方面很重要，而对于实验成功与否，选择适当的方法纯化Oligo其实是十分关键的。一、为什么要纯化？Oligo有机化学原理是利用结合于固相载体（CPG）上的核...

2011 07-26

神经细胞培养实验用的各种基质

培养细胞的*培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。基础培养基绝大多数培养基是建立在*（...

2011 07-22

限制性内切酶位点优势效应

某些限制性内切酶对同一底物的不同位点切割效率不同，这种现象被称为内切酶的位点优势效应。1975年，Thomas和Davis（1）发现EcoRI并不是随机切割λDNA分子上的5个识别位点，其中对λDNA...

2011 07-19

IHC实验热诱导的抗原修复的可能机制

抗原修复（antigenretrieval；AR）是否可能?理论研究上尚未清楚，但是以高温、高压对常规固定石蜡切片进行抗原修复处理的实践表明，可以提高抗原—抗体阳性检测率，同时也可能会出现假阳性，现已...

2011 07-12

RNA提取常见问题

1、RNA降解A、新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。B、新鲜组织：某些富含内源核...

2011 07-04

抗体—微珠匀浆法

一种在抗体—微珠基质上快速捕获抗原的方法是将抗原溶液与微珠混合，旋转或振荡制成匀浆。这种方法可使抗原和固相化的抗体之间zui大限度地接触，是一种促使结合反应快速完成的方法。结合反应完成后，将匀浆装入层...

2011 06-30

质粒提取纯度不高的因素

A、蛋白质污染建议：选择推荐量的菌体，离心后小心吸取上清，如果上清液中混有悬浮物，可再次离心，以*去除蛋白质。B、RNA污染建议：检查配送的RNAseA是否*加入到BufferA1中，加入RNAseA...

2011 06-27

单克隆抗体细胞的选择

（一）脾细胞1．材料（1）免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。（2）1640培养液（3）2.5％FCS－1640营养液2．操作方法（1）拉颈或用CO2处死小白鼠。（2）将小鼠放于70％酒精中浸泡消...

2011 06-20

脂肪酸的β-氧化过程

一、脂肪酸的β-氧化过程肝和肌肉是进行脂肪酸氧化zui活跃的组织，其zui主要的氧化形式是β-氧化。此过程可分为活化，转移，β-氧化共三个阶段。1.脂肪酸的活化脂肪酸参加代谢前和葡萄糖一样也先要活化...

2011 06-16

人们抗压能力的蛋白的发现

们每天都要面对各种各样的压力，有的人精神状态好，能坦然面对；有的人则惶惶不安，进而患上抑郁症、焦虑症等精神疾病。之前这种差异背后的病理机制尚不清楚，不过近日研究小组发表在《自然》杂志上的报告称，人大脑...