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降低组织非特异性染色2015/8/14
如何zui大限度地降低组织非特异性染色？（）缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是zui重要的一条。（2）一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。（3）内源性过氧化物酶和在肝...
免疫组化实验操作2015/8/12
.抗体稀释应遵循“现用现配”的原则，对于PBS稀释的抗体一定要当天使用。2.背景高在抗体浓度、反应时间、反应温度等合适的条件下，如果背景依旧高，可采用含‰Tween20的PBS洗，特别是在显色之前要多...
免疫组化和细胞凋亡检测2015/8/10
免疫组化镜检在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位：细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达（如：MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上）和表达组织（如：VWF抗体在...
操作的安全性与简便性2015/8/7
显色取出SDS-聚丙烯酰胺凝胶，经超纯水清洗2次，每次分钟，4块胶分别按4种不同的染色方法显色。下列每步操作皆在摇床上进行。4种染色法成份组成及操作如下：ELISA试剂盒①传统考马斯亮蓝染色法：清洗后...
银 加强液 漂洗 缓冲液 定影液 配置及保存方法2015/8/5
A液(HEPES贮存液)：称取23.83gHEPES溶于80ml双蒸水，用mol/LNaOH调至pH6.8(不能用HCl)，用双蒸水补充至终体积00ml即为mol/LHEPES贮存液。4℃保存。ELI...
非标记抗体免疫电镜操作方法2015/8/3
操作方法．经典法（）将被检病毒材料0.9ml，加︰5～︰0稀释的特异性免疫血清0.ml充分混合。（2）置37℃作用h或37℃h后再置4℃过夜。ELISA试剂盒（3）以7000r/min～23000r/...
胶体金的方向2015/7/31
方向选择在这里要做一个区分，一个是研究，一个是。两者区别是研究偏向学术性质，偏向出产品商业性质。其实两者之间并无明确界限，仅仅是一个目的倾向而已。ELISA试剂盒．研究方向做为学术性质的研究探讨，可以...
3种常用的化学染色荧光素2015/7/27
乙酸甲酯：其本身不发荧光，但透膜进入细胞质后，在酯酶的作用下转变为具有荧光特性的乙酸甲酯。其激发光谱有pH依赖性，是使用zui多的细胞内pH荧光指示剂。zui大激发光波长为505nm，zui大发射光波...
荧光显微镜的注意事项2015/7/24
注意事项：()因观察荧光使用的光源为高压汞灯，其中发出的光含紫外光，对人眼有损害作用，故必须安装紫外防护罩。ELISA试剂盒(2)为延长汞灯寿命，打开汞灯后不可立即关闭，以免水银蒸发不*而损坏电极，一...
原位杂交组织化学双链DNA探针和靶DNA变性2015/7/22
杂交反应是指用杂交液孵育组织切片，杂交液中标记的核酸探针在适当的条件下与组织细胞内相应的靶核酸互补结合形成杂交体的过程。杂交液的成分与预杂交液基本相同，所不同的只是加入标记的核酸探针。ELISA试剂盒...
原位杂交结合免疫技术2015/7/20
原位杂交结合免疫组织化学技术主要用于在同一细胞内同时或先后检测特定基因在核酸和蛋白质或多肽水平的表达，这样。不仅能了解基因表达，而且还能研究某种基因表达的翻译和转录调节。如果免疫组织化学检测的抗原成分...
免疫胶体金电镜技术的特点2015/7/17
技术的主要优点：①省时．程序较酶标抗体法简单；②不需H2O2等处理，对组织细胞超微结构保存较好；③金颗粒电子密度高，电镜下容易识别，且易于同其他免疫反应产物区别；④可与酶标抗体或铁蛋白标记抗体等相结合...
非标记抗体酶法——酶桥法2015/7/15
?首先用酶免疫动物，制备效价高、特异性强的抗酶抗体；?以二抗作桥，将抗酶抗体联结在一抗上；?再将酶结合在抗酶抗体上，经显色显示抗原的分布–优点：任何抗体均未被酶标记。酶是通过免疫学原理与酶抗体结合的。...
一抗的种属来源和类别亚型2015/7/13
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时...
检测抗原特异性IgE抗体的方法2015/7/10
有两种方法用来检测抗原特异性IgE抗体：（）IgE抗体检测，前面称为放射免疫吸附试验（2）淋巴细胞组胺释放试验。描述淋巴细胞组胺释放试验是在50多年以前，随后它被改进和自动化。22-25先用葡聚糖沉淀...
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