液相色谱仪测定葡萄中有机酸的含量

有机酸是果品中重要的风味营养成分,广泛存在于各种植物果实中,一些有机酸还是生物体重要的代谢中间产物。葡萄果实中的有机酸主要有酒石酸、苹果酸和柠檬酸,其组成与含量是决定葡萄果实风味和品质的重要因素之一。酒石酸是葡萄果实的特征酸,其它水果中未见积累,其酸度很强,是葡萄、葡萄酒酸度的主要贡献者。果实的味感大部分取决于甜味和酸味、苦味之间的平衡,味感质量则取决于这些味感之间的和谐程度,有机酸的种类及其浓度调节着“酸碱的平衡”,必然会影响葡萄、葡萄酒的酸味。因此,对有机酸的准确定量测定在果品品质鉴定中占有重要地位 。

有机酸的分析方法常见的有酸碱滴定法、薄层色谱法、气相色谱法、离子色谱法、液相色谱法等。酸碱滴定法仅适用于常量分析,且只能测定总酸含量;薄层色谱法度和灵敏度较低;气相色谱法必须进行复杂的衍生化,操作繁琐误差较大;离子色谱法对样品的处理要求较高,前处理非常复杂,耗时长。液相色谱法前处理比较简单,适合高沸点的非挥发性有机酸的测定,而且具有操作简单,准确度高、重现性好的优点,可以同时测定样品中多种有机酸,目前有着广泛的应用。

实验采用反相液相色谱测定有机酸的方法,分析速度快,灵敏度高,结果准确。

实验仪器设备：

LC-600B型液相色谱仪

LC-600B智能全控液相色谱系统由1台P600B高压恒流泵、1台UV600B紫外检测器与1台SCL600B系统控制器直接构成梯度分析系统。*采用柱塞浮动式安装方式，增强仪器性能的稳定性和使用的持久性。

广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。

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pH计

标准品的配置：

准确称取抗坏血酸50mg,酒石酸250mg,苹果酸、柠檬酸各500mg,乳酸、乙酸各1000mg,用流动相溶解并定容至50mL作为标准储备液。将标准储备液用流动相稀释成不同浓度进样分析,以有机酸浓度(mg/mL)为横坐标,峰面积为纵坐标,建立线性回归方程。

样品测定方法：

准确称取鲜葡萄100g,破碎后,加100mL蒸馏水,高频超声提取40min,过滤后的溶液定容至250mL。进样前经0.45μm滤膜过滤,计算各有机酸含量。

色谱条件：