上海锐谷生物科技有限公司作者
AGP是在琼脂凝胶中进行的抗原-抗体免疫沉淀反应,主要用于病毒抗原型特异性鉴定,即用已知阳性血清和未知抗原进行AGP试验。AGP是用来检测A属(型)流感病毒特异性血清抗体,即抗RNA-核蛋白(即RNP)和基质蛋白(M1)抗体,因而适用于鉴定流感病毒。1970年Beard将AGP用于禽流感Ab的检测。
该法优点是简便快捷,特异性强,不受病毒亚型限制,缺点是灵敏性较低。
目前AGP法中zui常用的是免疫双扩散,与普通AGP法相比,不仅提高了其敏感度,且快速省时,以此法为获得了良好的结果。Ag制备:感染鸡胚尿囊膜磨碎,反复冻融或超声裂解,然后低速离心,上清灭活即可。1987年,我国学者报道了用AIV尿囊液经超速离心、浓缩,用福尔马林灭活制备Ag,效果较好。赵增连等在琼脂板中加入3%的PECk6000,则AGP的敏感性提高,且快速省时。
免疫单辐射扩散试验、单辐射溶血试验、对流免疫电泳等也常用于AIV及其抗体的检测,但这几种免疫沉淀试验都需在凝胶中进行,敏感性较差,对低滴度样品都会出现假阳性结果,而且AGP所需试剂及Ag、Ab的量较大。所以寻找更敏感的微量、快速的检测和诊断方法很有必要。
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