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mRNA为单股，一般会卷绕成特定的三级结构，并与某些蛋白质结合，而以messengerribonucleoproteinparticles（mRNPs）的型式存在于细胞内；自细胞抽取RNA时，一般会以...
1简介DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。...
方法步骤：1）经BamHI及HindIII作用的pBlueGus及pQE31，置65℃水浴10min，移至冰浴降温后，以含EtBr的1.0%agarosegel进行电泳。2）NA45以灭过菌的剪刀剪成...
方法步骤：1）经BamHI及HindIII作用的pBlueGus及pQE31，置于65℃水浴10min，移至冰浴降温后，以含EtBr的1.0%agarosegel进行电泳（两种样品各用六个wells，...
方法步骤：1）前一天进行转形的培养皿，当菌落长至约0.5mm大小时，将培养皿移至4℃放置至少1h。2）准备一张无菌的硝化纤维滤膜，以铅笔在边缘标上组别。◆请戴手套后再拿取滤膜！3）打开培养皿盖子，以两...
方法步骤：◆注意！进行这一部份实验的前，请先确定pBlueGus/HindIII与pBlueGus/BamHI两者的酵解反应都已经*。1）于酵解反应#1与#2的微量离心管分别加入182μL去离子水。2...
[方法]1．配制1个50ul连接混合液，包含：●10×连接缓冲液，5uI●水，16ul●NcoI和NotI消化的pHENl（100g／ul），20ul●VcoI和NotI消化的scFv文库（100g/...
[方法]1．设计并合成含有CDR3随机化序列的VHFOR引物。当然必须以拟进行亲和力成熟的抗体VH基因作为设计的基础。本例中，VHCDR3的7个氨基酸被随机化。在每个随机化位点中，保留了大约50％野生...
[方法]1．配制50ulPCR反应混合液，包含：●水，34．5ul●20XdNTP（每种5mmol／L），2，5ul●10XVent聚合酶缓冲液，5．0ul●LMB3引物（10pmol/u1），2．5...
在基于结合动力学，也被称为解离速率（κoff）]的选择中，在将远远过量的非标记抗原加入到混合液中并维持一段特定时间之前，将首先选用饱和量的标记抗原使其与噬菌体群结果。通过确定与末标记抗原竞争的持续的时...
（1）蛋白酶消化蛋白酶消化可以去除覆盖于抗原决定簇表面的杂蛋白，更为重要的是因甲醛固定而引起的交联被打开，有利于抗原—抗体的结合，提高阳性检测率。（2）抗原修复选择适宜的修复液（pH值、离子浓度）、修...
①胶体金溶液可以重复制备，其颗粒大小可以控制，可较容易进行免疫电镜的双重或多重标记；②金标探针有很高的电子密度，有特殊的分辨率，定位准确；③金标探针能发射二次电子和反射电子，是扫描电镜目前的标记物；④...
胶体金可用多种方法制备，其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂，使金离子还原为金原子，可用于制备胶体金的还原剂有50余种，但在生物医学领域内zui为常用...
乙醇—超声波还原法（Baigent和Muller，1980）（1）取1％AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml双重蒸馏水。（2）用0．2m01/LK2C03调pH至7．2，再加入lml无水乙醇。...
[方法]1．建立以下连接反应：●载体DNA（pG6AppG6B，pG6C）（10ug）xul●cDNA片段（3～5ug）yul●10×连接缓冲液40ul●T4DNA连接酶（6WeissU/ul）5ul...
[方法]1．加2～3ul纯化的连接反应物（zui大值为0.3ugDNA）到80ul的*0F’电转化感受态细胞中，轻轻摇晃混合。使用30ng（2ul）的pUCl9控制电转化效率。2．将细胞+DNA悬浮液...
[方法]1．在0．5ml微量离心管中配制50ulPCR反应混合液，包括：●Millipore水，31.5ul●10×VentDNA聚合酶缓冲液，5．0ul●20×dNTP，2．5ul●正向引物，2．0...
[方法]1．在0．5ml微量离心管内配制以下PCR反应混合液。配制成2个“反应管”，1个含有V。文库DNA，另1个则含有Vl文库DNA。反应管对照1对照2●scFV接头DNA（100ng/ul）1．0...
[方法]1．在0．5ml微量离心管中，配制两个50/z1PCR反应混合液（1个用于VH—VκscFv文库，另1个用于Vu—VλscFv文库），其中含有：●水，36．5//1●10XTag缓冲液，5．0...
[方法]1，配制两个100ulPCR反应混合液来消化scFV文库，其中1个用于VH-VκscFv文库，另1个用于VH-VλscFv文库，该混合液含有：●scFVDNA（1～4ug），50ul●水，33...
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