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转化后，就得到了菌苔形式的抗体文库。可以制备成甘油储存物保存于一80℃。这是一个原始文库，象征着具有*价值的资源。的抗体文库也是由这种原始文库制备而来的。然而，当用大培养板铺板扩增原始文库时，会造成部...
1．取适当数量（参见上述讨论）的甘油文库储存料接种到含有250m12×TY/amp/glu的2L培养锥形瓶中。培养基的A600值应小于0．05。从每个培养瓶中取1ul铺板确定起始接种物的细菌量。2．在...
1．用溶于PBS的2m1抗原（10—1000ug/m1）包被免疫管，室温过夜。碳酸盐缓冲液也可使用。2．用PBS洗涤试管3次，并用2％MPBS封闭非特异性结合位点，放在旋转的转台上，37℃l小时。3．...
液相法可以解决直接包被于固相表面的抗原构象可能发生改变的问题。此外，这个方法也使以结合性亲和力使基础的选择更加简单，因为展示多个抗体的噬菌体并无选择优势。液相法也易于控制抗原的浓度，这也有利于选择到有...
1．将100ul含有2×1010个PEG—纯化噬菌体颗粒的TBS，等量分加到多孔板各孔中，4℃孵育12小时。2．用PBST洗涤数次，在室温下每孔加250/ll封闭液封闭2小时。3．用封闭液稀释血清，其...
1．用无菌塑料吸嘴挑取一个AmpR噬菌粒菌落（直径大约lmm）并将其转入到0．2mlMicroAmp反应管中，内含20u1洗脱缓冲液。在GeneAmp9600PCR仪中，95℃加热样本10分钟（避免用...
1．为了洗脱细菌，将900ul的K91KanTerrific肉汤菌液加入裂解后的细胞，并于室温下孵育20分钟。2．将步骤1所得全部倒入含有9m1四环素浓度为0．2ug/ml的NZY培养基的50m1锥形...
1．通过腹腔注射浓度为1．25％（w/v）的阿佛丁来麻醉小鼠，剂量为每克体重注射15ul的阿佛丁。开始时用*注射300ul。用右手抓住一只小鼠尾部的并提起，使其后腿离地。然后用左手抓住鼠的头和颈的后部...
A．辅助噬菌体感染和pⅧ诱导产生1．按10:1感染重数加入VSC-M13辅助噬菌体[约1012空斑形成单位（pfu）]到100ml已转化的细菌中（见实验方案6．3）。于37℃静置孵育30分钟。2．将上...
A．连接反应1．在13m1离心管中混合下列物质：●20/igp8V5载体（经BstⅪ酶切和纯化）●1．25ug插入DNA片段（经BstⅪ、BsiHKAI酶切和纯化）●200ul10×连接缓冲液●4ul...
1．从新鲜（时间不超过1周）的2YT／tet平板上挑取单个大肠杆菌SS320的克隆，接种到lml2YT／tet培养基中。37℃200r／min孵育6～8小时。转移培养基到含有50m12YT／tet培养...
1，用一系列稀释液感染大肠杆菌XLl-Blue（OD600＝0.5～1.0），并涂布在用于噬菌粒筛选的适当培养基上，以测定噬菌体文库储液的感染性滴度（infectivitytitre）。这个滴度取决于...
据《科学时报》报道姚明为何能长那么高?原因很可能在于基因的不同。英国科学家近日发现了一种对人类身高有决定性作用的基因，在其他条件不变的情况下，这种基因遗传密码只要有微小的变化，就可以促进身高增长一厘米...
据《*》报道咖啡是许多人生活中*的饮品，其主要成分咖啡阴能够帮助人们时刻保持充沛精力。但是科学家们近日发现，除了这一功效外，喝咖啡加上经常运动可以有效降低皮肤癌的患病率。长时间的紫外线照射会伤害到人体...
免疫印迹从早期用抗体直接“着染”聚丙烯酰胺凝胶内的蛋白（Burridge1976；Showe等1976）发展为使用多样化复制技术的方法。例如，将分离的多肽转移至硝酸纤维素膜，化学活化的滤纸条或尼龙膜上...
当皮肤受到紫外光（ultravioletlight;uvlight）照射时，称为角朊细胞（kerotinocyte）的皮肤细胞会开始分泌黑细胞促素（melanocyte-stimulatinghorm...
当你在阅读这篇报导时，在世界的某个角落可能就正发生不幸的车祸，造成受害者终生瘫痪而无法再行走。或者此时此刻，在某个医院诊疗室的神经科医师，正无力回天地对病人宣判他们可能罹患多发性硬化症或肌萎缩性脊髓侧...
1．动物的选择纯种BALB／C小鼠较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALB／C小鼠。2．免疫方案免疫方案应根据抗原...
放射免疫分析（radioimmunoassay，RIA）是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。于1960年由美国学者Yalow和Berson创立，并首先用于糖尿病患者血浆胰岛素含量的测定。这是医学和...
（1）ELISA检测STDe．Mai等（1983）以过氧化物酶标记抗体，用抗原竞争间接法检测培养液中STl。定性检测时底物用5—氨基水杨酸，定量时用邻苯二胺。此法与乳鼠试验的相符率为96．7％，无假阳...
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