上海士锋生物科技有限公司
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抗体
生物试剂
细胞
菌株
血清
细胞分离试剂
试剂盒
4 2016-5

CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞

原理:转化(Transformation):将外源DNA分子引入受体细菌,使之获得新的遗传性状。受体细菌一般是限制修饰系统缺陷的变异株,不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-,M-),可以容忍外源D...

25 2016-4

克隆PCR产物问题与解答

1.问题:RT-PCR灵敏度:在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。可能原因:1)RNA被降解建议解决方法:在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA使用良好的无污染技术分离RNA;在将组...

19 2016-4

扩增酶切片段多态性(AFLP Protocol)

RestrictiondigestionMastermixpreparation:Prepareamastermixofthefollowingpersample,plus5to10%extratoa...

14 2016-4

引物设计原则

1.引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taqdna聚合酶进行反应。2.引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是3’端相...

6 2016-4

实时定量PCR*手册

方法简介所谓的实时荧光定量PCR就是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光化学物质,随着PCR反应的进行,...

30 2016-3

质粒DNA形态的电子显微镜观察

一、原理球状蛋白质一般都可以在低盐溶液或蒸馏水表面形成不溶解的变性薄膜,若浓度合适,则肽链伸展形成蛋白质单分子层。一般用碱性蛋白质包围带负电的核酸分子,当蛋白质展开时,核酸也随之展开,核酸的形态结构将...

23 2016-3

定量PCR常见问题及对策

Q1.无CT值(信号)出现A1.1.反应循环数不够。一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环(如至45cycles),但高于45个循环会增加过多的背景信号。2.检测荧光信号的步骤有误。一般SG...

16 2016-3

RAPD技术应用中的一些问题及对策

摘要:综述了RAPD技术的一些理论性问题,包括RAPD与其它分子标记技术相比的优点,影响结果重复性的因素,显性标记产生的原因,条带取舍的标准等。提出在实验中解决这些问题的一些方法:严格控制反应条件,采...

7 2016-3

简单序列长度多态性

简单序列长度多态性(simplesequencelengthpolymorphism,SSLP)是据串联重复排列微卫星基序两侧的单一序列设计引物,对微卫星序列(microsaliteDNA或simpl...

29 2016-2

士锋基因定位克隆

习惯上,人们用克隆表示由同一物种具有相同基因型的两个或多个个体组成的群体。所以,从同一受精卵分裂而来的单卵双生子(monozygotictwins)便属于同一克隆。细胞学上,克隆是指由同一个祖细胞(p...

22 2016-2

TAIL详细介绍

在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列,TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR,能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引...

25 2016-1

RNAi在细胞培养中的应用

I.6-WellPlatesA.BathingII.384-WellPlatesA.BathingB.Transfection6-WellPlatesBathingPreparedsRNAsuspen...

21 2016-1

PROBE PREPARATION(探针制备)

PleasemakesuretoreferenceAndrewHamiltonforthisprotocolProbes:Iusesinglestranded,32PlabelledRNAprobes...

19 2016-1

MassPrep自动酶切程序操作标准(sop)

一开机前检查:1检查仪器台面(DECK)上所有的实验材料(Labware)。2检查SystemWater水桶的水位。3检查恒温循环水浴(Chiller)水箱的水位,并定期更换或填充Chiller中的循...

12 2016-1

RNAi常见问题及问答(FAQs)

有关Stealth™RNAi的问题什么是Stealth™RNAi?Stealth™RNAi是RNAi化学的新一代产品。Stealth™RNAi分子是经过...

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