上海士锋生物科技有限公司
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细胞分离试剂
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18 2016-7

质粒DNA转化感受态大肠杆菌的方法

一、实验目的学习外源DNA导入原核生物细胞的方法二、实验内容热激处理将外源质粒dna导入原核细胞。三、实验原理利用CaCl2处理感受态体细胞,然后通过热休克处理,即置于42℃高温热激90秒,热休克后,...

15 2016-7

DNA的重组

DNA的重组(一)DNA的酶切与连接(1)酶切反应同质粒dna的鉴定,只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切,则成比例增加。(2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/lNaAc混匀...

12 2016-7

提高质粒DNA的转化效率的几个重要因素

为了提高转化效率,实验中要考虑以下几个重要因素:1.细胞生长状态和密度:不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌,从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。细胞生长密度以刚进入...

6 2016-7

DNA的限制性核酸内切酶酶切实验和连接实验

酶切实验本实验学习用限制性核酸内切酶(Restrictionendonuclease)EcoRI切割λDNA及质粒pBR322DNA,琼脂糖凝胶电泳后观察酶切结果。【原理】λDNA是大肠杆菌的一种温和...

4 2016-7

基因克隆:感受态细胞制作方法

A液:1M,MnCl2:B液:1M,HEPES,pH=6.2-6.8,用无菌水配,配后不需灭菌;C液称取CaCl20.10g,KCl1.18g,全部转入细口试剂瓶,然后加入46ml三蒸水,轻轻振荡使所...

30 2016-6

士锋分离纯化DNA片段中的污染物方法和原理

胶回收dna片段一、实验目的1、了解分离纯化DNA片段中的污染物方法和原理二、实验原理首先利用低熔点琼脂糖凝胶电泳DNA片段,分离目的条带DNA,然后紫外光下切割含目的DNA条带的胶块,利用胶回收试剂...

28 2016-6

DNA双螺旋结构模型的要点

1)DNA分子是由两条长度相同,方向相反的多聚脱氧核苷酸链平行围绕同一中心轴形成的双排螺旋结构;两螺旋都是右手螺旋,双螺旋表面有深沟和浅沟。2)各脱氧核苷酸中磷酸和脱氧核糖基借磷酸二酯键相连形成的糖-...

22 2016-6

Dicer RNAi试剂盒进行RNAi分析的实验

选择BLOCK-iT™DicerRNAi试剂盒,利用RNA干扰技术(RNAinterference,RNAi)进行简单、快速的基因阻断,您不必再花费时间设计siRNAoligo序列及检测它...

15 2016-6

士锋DNA操作试剂配方

1.5×CTABCTAB15g1MTris·Cl(pH8.0)75ml0.5MEDTA30mlNaCl61.4gaddddH2Oto1000ml0.5MEDTA(pH8.0)EDTA-Na·2H2O1...

12 2016-6

简并引物设计的方法(含详细步骤)

简并引物设计的方法(包括实际操作步骤)简并引物是指用来编码一段短肽序列的不同碱基序列的混合物。主要用来同源克隆未知的基因,或用来分析某一种基因多态性的一种方法。简并引物设计的常见程序如下:1.利用nc...

2 2016-6

质粒DNA的制备

质粒是细菌内的共生型遗传因子,它能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞特定的表型。质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基...

30 2016-5

分子标记的种类及其发展

广义的分子标记(molecularmarker)是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。蛋白质标记包括种子贮藏蛋白和同工酶(指由一个以上基因位点编码的酶的不同分子形式)及等位酶(指由同一基因位点的不...

23 2016-5

DNA重组实验方法

DNA重组是将外源DNA与载体分子连接,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法。重组的DNA分子是在dna连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲...

18 2016-5

SSR标记实验步骤

SSR简单序列重复标记(Simplesequencerepeat,简称SSR标记),也叫微卫星序列重复,是由一类由几个核苷酸(1-5个)为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列,长度较短,广泛分布在...

9 2016-5

核酸抽提的基础技巧和方法

1、核酸抽提原理简单地讲,核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程,纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质*分离的过程。经典的裂解液几乎都...

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