上海士锋生物科技有限公司
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试剂盒
16 2015-9

随机引物PCR技术

.实验原理聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction)简称PCR,它是一种DNA体外扩增技术。1985年美国的Mullis等人发明了PCR技术,在体外利用模板DNA、特定的寡聚核苷...

6 2015-9

增加PCR特异性的方法

1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中zui重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所...

1 2015-9

士锋RNA干扰技术及其应用

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA...

27 2015-8

士锋生物目的基因的亚克隆

所谓亚克隆就是对已经获得的目的dna片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接...

19 2015-8

士锋PCR产物克隆方法

平端连接通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3"末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物...

11 2015-8

mRNA差异PCR技术

生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因,而主基因在某个特定的细胞中,只有占15%的一小部分表达。而且在不同的细胞中,选择性表达的基础也是...

5 2015-8

士锋影响PCR的主要因素

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,zui后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买pcr检测试剂盒就可开...

29 2015-7

PCR技术:用PCR扩增cDNA库中的特异序列

zui常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库,然后用抗体或DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因,但建立和筛选CDNA库是一项非常耗时.费力的工作,而且用寡聚...

27 2015-7

士锋DNA末端修饰原理

Chapter4replicationDNAreplicationDNAdamageandrepairReversetranscriptionRNAreplicationDNA复制的基本特点半保留复制...

24 2015-7

从酵母中小规模自然亲和纯化溶解膜蛋白

一、材料与方法1.EDTA(无蛋白酶抑制剂)(Roche)2.酸冲洗过的425-600玻璃珠(Sigma)3.洋地黄皂苷(digitonin)(EMDChemicals)4.蛋白酶抑制剂(DMSO,亮...

20 2015-7

如何进行-N-脱甲基酶活性测定

又名匹拉米洞,Pyramidon,Amidozon,Aminophenazon,Aminopyrine,由氨基经催化氢化(烃化)而得,解热镇痛作用较强,缓慢而持久,消炎抗风湿作用与相似。本品因能引起骨...

15 2015-7

士锋蛋白样品的定量

目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定...

10 2015-7

变性梯度凝胶电泳(DGGE)

一、实验原理变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm)。Tm值主要...

7 2015-7

士锋生物蛋白定量Commassie法和BCA法比较

蛋白测定是在生命科学研究中zui广泛应用的方法之一。在蛋白提纯,电泳,免疫分析,细胞生物,分子生物和其他研究应用时评估蛋白浓度是必需的。虽然目前有各种不同的蛋白测定方法,但仍然还没有一种测定方法被认为...

23 2015-6

蛋白质定量

一、Bradford法该方法用于大多数蛋白质定量是相当的,特别是用于小分子多肽定量。如核糖核酸酶或等。但是,去污剂的浓度超过0.2%则影响定量结果。如TritonX-100,SDS,NP-40等。1....

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