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细胞分离试剂
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5 2016-1

引物设计的原理与程序

一、设计原理1.选择合适的靶序列:设计引物之前,必须分析待测靶序列的性质,选择高度保守、碱基分布均匀的区域进行引物设计。2.长度:一般来说,寡核苷酸引物长度为15-20bp.3.Tm值:引物的Tm值一...

30 2015-12

PCR文献检索方法简介

检索途径在进行文献检索时,我们可根据文献的内部特征或外部特征进行检索。文献的内部特征是指文献所论及事物,所提出的问题,涉及的基本概仿即主题以及文献内容所属的学科范围都是文献的内部特征;文献的外部特征包...

28 2015-12

如何进行基因打靶技术

1.原理首先获得ES细胞系,利用同源重组技术获得带有研究者预先设计突变的中靶ES细胞。通过显微注射或者胚胎融合的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内。经过遗传修饰的ES细胞仍然保持分化的性,可以...

24 2015-12

小麦黄化苗总DNA的提取

一、实验目的学习和掌握DNA的微量提取法。二、实验原理小麦黄化苗经液氮研磨,可使细胞壁破裂,加入去污剂(如SDS),可使核蛋白体解析,然后使蛋白和多糖杂质沉淀,DNA进入水相,再用酚、氯仿抽提纯化。本...

21 2015-12

重组DNA的转化实验

实验目的制备出感受态细胞,把体外重组的DNA引入受体细胞,使受体菌具有新遗传性,并从中选择出转化子。实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态,只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。p...

14 2015-12

分级定量PCR检测血清HBV DNA

目的利用竞争PCR法建立分级测定HBVDNA含量的定量方法.方法设立3个标准竞争模板(102cop,104cop,106cop),分别和恒量的待测模板混合,分别进行40,30,20次循环的pcr扩增,...

9 2015-12

避免RNA酶污染的方法

RNase酶非常稳定,是导致RNA降解zui主要的物质。它在一些的条件可以暂时失活,但限制因素去除后又迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的RNase*失活。为了获得高质量的真...

2 2015-12

PCR技术研究新进展

1实时定量RT-PCR的原理、方法和应用1.1实时定量RT-PCR的原理实时定量pcr的发明归功于两个重要的发现:一是发现DNATaq酶有5′3′外切酶活性,二是利用荧光能量传递技术构建了双标记寡核苷...

23 2015-11

如何提高PCR扩增的保真性

下游应用为基因筛选、测序、突变检测和分子诊断等等的用户,对PCR保真性要求很高。降低PCR扩增的错误率可以通过使用各种具有高保真性的dna聚合酶来实现。DNA聚合酶的保真度用错误率来表示,包括碱基错配...

17 2015-11

细菌染色体DNA 的抽提

一、目的熟练掌握抽提细菌DNA的一般方法二、原理要进行重组DNA实验,就离不开外源基因的纯化,而外源基因主要来源之一就要直接从生物的染色体DNA上制备,所以制备高质量的染色体DNA样品经常为基因工程实...

10 2015-11

兔肝RNA的制备及测定

实验目的:学习从兔肝中提取RNA的方法。通过地衣酚显色法测定RNA的含量。实验原理:细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA时,首先遇到的是必须使RNA与...

26 2015-10

动物基因组DNA/RNA提取及含量测定

实验原理核酸和蛋白质是构成生物有机体的主要成分;核酸是生命的zui基本物质。在生物体中它们结合成核蛋白的形式存在。核酸按其化学组成可以分成两大类,一类含D-2-脱氧核糖的称为脱氧核糖核酸(DNA),主...

19 2015-10

小麦总RNA的提取实验

黄化小麦苗中提取总RNA,可以为cdna文库的构建做好准备。我们重点是要保证RNA的完整性、产率、防止修饰和纯度,尤其是完整性、防止修饰和纯度。RNA是单链,2’OH是它的化学性质远比DNA活泼。所以...

12 2015-10

DNA的限制性内切酶酶切

实验目的1.学会DNA限制性内切酶酶切技术。2.琼脂糖凝胶电泳法观察酶切DNA的结果。实验原理质粒pUC118上有限制性内切酶BamHI的识别序列G↓GATCC,用BamHI酶切后形成线性质粒dna。...

8 2015-10

RNA的提取和cDNA合成

*节概述从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的*链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增,即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表...

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