2015 08-03

网状纤维染色－Wider染色法

网状纤维染色－Wider染色法：可以用来显示病变组织网状支架的破坏情况。特别是在肿瘤病理诊断中，网状纤维染色对于鉴别来源于上皮组织和间叶组织的恶性肿瘤具有重要价值。细胞染色步骤：①组织切片脱蜡至水。1...

2015 07-31

使用浓度对荧光PCR结果的影响

使用浓度对荧光PCR结果的影响：ELISA试剂盒SYBRGreenI的使用浓度是影响实验成功与否的关键因素，如果SYBRGreenI的浓度不饱和会使荧光信号不能反应产物量的变化。而过高浓度则会抑制PC...

2015 07-27

免疫荧光组织化学的检查方法

检查抗原法：此法是免疫组织化学zui早使用的方法，用荧光素标记已知特异性抗体，直接与组织细胞中相应抗原结合，在荧光显微镜下可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异性强，快速而简便，但是，由于一种荧光抗...

2015 07-24

非特异性荧光染色的消除

组织的非特异性荧光染色机制很复杂，其产生的原因主要有：一部分荧光素末与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，不能被除去；抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白与组织成分结合；除被检抗原以外，组织中...

2015 07-22

原位杂交组织化学探针对照

已知阳性组织和已知阴性组织对照用探针在已知含靶核酸序列的阳性组织和已知不含靶核酸序列的阴性组织标本上进行原位杂交，应分别得到阳性结果和阴性结果。如果已知阳性组织出现阴性结果，则应对探针的制备及原位杂交...

2015 07-20

原位杂交组织切片技术

冰冻切片在原位杂交中以冰冻切片zui常用。切片时，要尽量避免RNA酶污染，操作时需戴手套，使用70％酒精擦洗工作台、切片机刀架、摇柄和载物台等手常接触的部位以及其他器械。切片厚度可根据具体情况而定。如...

2015 07-17

胶体金标抗体的染色方法

利用两种不同直径的胶体金颗粒标记两种第二抗体，在电镜下进行两种不同抗原的亚细胞定位。基本原则：首先需购买拟研究的两种抗原的特异性抗体，以及不同直径金颗粒标记的相应第二抗体，然后在同一张载网上分别或同时...

2015 07-15

间接免疫荧光法操作步骤

间接法又称为荧光抗-抗体法?需要两种抗体参与，即一抗和二抗(荧光素标记)。一抗对标本中的抗原来说起抗体的作用，但对荧光标记的二抗来说又起着抗原作用。–可用来检测标本中未知抗原，也可检测血清中未知抗体。...

2015 07-13

荧光抗体染色间接法

间接法（1）切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的湿度，37℃作用30min。然后用0.01mol/lpH7.2PBS洗两次，10min，用吸水吸去或吹干余留的...

2015 07-10

抗原与抗体的结合作用

抗原与抗体的结合作用抗体（Ab）和抗原(Ag)的交互作用与经典的质量动力反应学描述的双分子反应相似：[Ag]+[Ab]游离抗原和游离抗体可逆地反应形成抗原-抗体复合物。重排等式可以得到一个亲和力（平衡...

2015 07-08

免疫组化非特异性染色的问题解决

①是否有效地去除了内源性酶和*。应注意的是，并不是每一种组织均需要进行此步骤，但对于内源性酶或*丰富的组织，如肝脏、肾脏等，需考虑此原因。处理的方法为：灭活碱性磷酸酶：zui常用的方法是将左旋咪唑（2...

2015 07-06

免疫组化的结果分析

DAB显色时间如何把握？1.DAB显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗。2.DAB显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或...

2015 07-03

环境条件影响*活性强弱的实验步骤

实验步骤1.*的提取取已发芽的水稻或小麦种子（幼芽长3～4cm）20粒，放在研钵中研磨，匀浆用100ml水分多次冲洗，集中于150ml三角瓶并充分搅拌、静置1小时后，过滤入另一三角瓶，滤液中即含有*，...

2015 07-01

寡核苷酸与抗体的结合

寡核苷酸与抗体的结合连接用的抗体可以是特异性一抗，也可以是第二抗体或其他的连接二抗，如抗（Dig）、抗荧光素（FITC）或抗*（biotin）二抗。1．抗体的脱盐和活化首先对抗体免疫球蛋白进行脱盐，然...

2015 06-29

培养基的质量要求

对每一个批次产品取适量样品进行微生物污染的测试。按批量的不同选择适量的培养基在适当条件下培养，测定其微生物污染。生产商应根据每种平板或液体培养基的数量，规定或建立其污染限值，并记录培养基成分、制备要素...

2015 06-26

ELISA常见问题及处理对策

可能原因解决方法ELISA试剂孵育的时间没有按说明书操作确定*化抗体，连接的HRP试剂或链霉亲和素-HRP使用的时间是否适当。不同试剂盒或不同批号的试剂混用重新检查试剂的标签，确认所有组分都属于正使用...

2015 06-24

病理学展片与脱蜡技术

展片与捞片展片水温应在42℃至47℃之间，这主要和包埋蜡的熔点有关,水温过高，会引起组织细胞散开，水温过低，切片皱摺无法摊平。包埋蜡中如有二甲苯，也会造成石蜡溶解现象。而用一次性刀片切的片子，一碰到热...

2015 06-19

建立细胞系（或株）的要求

什么样的体外培养群可被认可为己鉴定的细胞，视具体情况而定，无统一规定。对于用作原代培养的细胞只要供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定即可，如用做长期培养，特别是反复传代的细胞，常需做如下说明：1、组...

2015 06-17

曲霉素ELISA试剂盒产品特点

曲霉素ELISA试剂盒产品特点●快速——只需要20分钟●检测范围：2.0--100ng/ml（ppb）●可半定量和定量分析●可分析单个样品，也可成批分析样品（用于更经济的检测）●操作简便易处理，作用效...

2015 06-16

ELISA试剂盒标本的采取和保存

标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液、分泌物和排泄物）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部...