2016 02-19

DNA聚合酶及其应用

DNA聚合酶及其应用（一）大肠杆菌DNA聚合酶I是KornbergA.1956年首先从大肠杆菌E。Coli细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶，包括3种不同的酶活力：ELISA试剂盒5′→3′聚合酶...

2016 02-17

免疫荧光组织化学

免疫荧光组织化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素...

2016 02-15

B细胞的表面结构以及来源

（一）来源、分布及数量B细胞由骨髓淋巴干细胞分化为前B细胞，在骨髓微环境中发育、成熟为可识别抗原的成熟B细胞，后经血液循环定居在外周淋巴器官。成熟B细胞可在识别抗原后，进一步分化为能分泌免疫球蛋白的浆...

2016 02-03

蛋白质复合物的基本流程

（一）样品的制备在这部分内容中，主要描述了直接收集细胞内总蛋白的方法、用免疫沉淀获得蛋白质的方法，及其随后用双向电泳分离、用银染或West-ern印迹检测的样品制备。如果采用了其他的检测方法，如GST...

2016 02-01

淋巴细胞数量与功能检测

淋巴细胞及其功能检测常用于对机体免疫状态进行评估及对疾病疗效的监控。（一）淋巴细胞数量检测1.T细胞数量检测常用间接免疫荧光法，检测T细胞表面的CD3、CD4、CD8，来了解外周血T细胞数量及亚群的变...

2016 01-29

影响脐血采集的因素

影响脐血采集的因素除了技术熟练，保证断脐后迅速穿刺脐静脉外，胎儿体重、胎盘大小等均影响到脐血的采集量。ELISA试剂盒1.采集时机胎儿娩出5min内脐带/胎盘的血流较为丰富，此时采集可增加采血量，故在...

2016 01-27

原核细胞的表达特点

同所有的生命过程一样，外源基因在原核细胞中的表达包括两个主要过程：即ＤＮＡ转录成ｍＲＮＡ和ｍＲＮＡ翻译成蛋白质。与真核细胞相比，原核细胞的表达有以下特点：（１）原核生物只有一种ＲＮＡ聚合酶（真核细胞有...

2016 01-25

微生物依据氮源谱的分类

凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质，称为氮源。细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质的重要元素，氮对微生物的生长发育有着重要作用。从分子态的N2到复杂的含氮化合物...

2016 01-22

遗传物质的结构和功能

随着遗传学的发展，遗传物质的特点不断被认识：①它必须携有生物的各种遗传信息；②它必须能够地复制，这样才能稳定地传递遗传信息；③它必须能够变异，如果没有变异．生物就不能改变和适应，进化也不会发生。189...

2016 01-20

温敏突变株的筛选方法

温度敏感突变株(简称温敏突变株，Ts突变株)是一种条件致死突变株，它们在许可溫度下能正常生长，在非许可温度下不能生长。温敏突变株主要由必需基因突变引起，也可由非必需基因突变产生。由后者形成的Ts突变株...

2016 01-18

星形胶质的培养

星形胶质的培养星形胶质细胞在中枢神经系统中发挥着多种作用，组成血脑脊液屏障，营养和支持神经元，与神经元突触的发生有着密切。1．材料(1)材料来源：新生1周内大鼠的脑组织。(2)手术器械：解剖剪、解剖镊...

2016 01-15

小鼠ELISA试剂盒检测试验技术

ELISA试剂盒是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。浓缩：由于净化过程中引入的溶剂，可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接分析，需要...

2016 01-13

细胞常见问题

细胞常见问题1.血清中可能出现的沉淀物是什么？基于多年的实验研究，用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物：（1）纤维蛋白，它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1-2mm，可以用...

2016 01-11

酵母菌的杂交

酵母菌是单细胞的真核微生物。酵母菌的有性繁殖是通过形成单倍体的子囊孢子的方式进行的。酵母菌存在单倍体和二倍体的生活史，具有孟德尔式的分离现象，以及a和a接合型．具有这两种接合型的子囊孢子萌发生长成单倍...

2016 01-08

初代细胞培养的传代

(一)贴壁细胞(包括半贴壁细胞的换液)初代培养成功，由于营养缺乏，代谢产物增多，细胞未达到饱和密度，仍需继续培养，因此，需采取换液方式来更新营养成分以满足细胞继续生长繁殖的需要。其换液方法比较简单．即...

2016 01-06

显示染色体的检测方法

(一)原理显示染色体主要是显示分裂中期细胞。因细胞分裂处于中期时，染色体的长短和大小恰到好处，是研究染色体的阶段。所以，*需要获得多量的中期分裂象；第二·人类染色体有46条，密集在细胞中，相互交错缠绕...

2016 01-04

小鼠腹腔巨噬细胞

人巨噬细胞可从外周血或经斑蝥激发的皮疱液中获取，也可从肺灌洗液或患者*中分离，但操作烦琐，得量不多。许多实验室在进行基础或配合临床研究巨噬细胞功能及其与疾病的关系、或筛检免疫增强药物和探讨其作用机制时...

2015 12-31

葡萄糖在细胞内的转运实验

(一)试验原理葡萄糖在细胞内的转运系统包括细胞膜、胰岛素受体和葡萄糖转运载体等。胰岛素和某些降血糖药对该系统具有激活作用，可促进葡萄糖转运，从而调节糖代谢。本实验通过离体睹肪细胞与2一脱氧一3H一葡萄...

2015 12-28

程序外DNA合成实验

在正常的细胞有丝分裂过程中，仅S期是DNA合成期。当DNA受到损伤时，损伤修复的DNA合成主要发生在其他细胞周期，称非程序性DNA合成，又称程序外DNA合成(unsched，aledDNAsynthe...

2015 12-25

0．25％*的配制方法

1)训练目的掌握0．25％*的配制方法和无菌处理方法。2)实验原理0．25％*常用来离散组织获得单个细胞，或者消化需要传代的贴壁细胞。培养基则为细胞生长提供必需的营养物质，是细胞赖以生存的重要支持物，...