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上海源叶生物科技有限公司


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上海源叶生物科技有限公司

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公司动态
  • 发布时间

    2010/8/19

    DL-赖氨酸盐酸盐

    英文名称：DL-LysineHCLCAS号：70-53-1C6H14N2O2•HCL=182.65含量：≥99.0%性状：白色或类白色结晶性粉末用途：科研、实验保存：RT，避光保存【详细】 阅读：200

  • 发布时间

    2010/8/19

    L-赖氨酸盐酸盐

    英文名称：L-LysineHCL其他名称：（S）-2,6-二*盐酸盐CAS号：657-27-2C6H14N2O2•HCL=182.65含量：≥99.0%比旋光度：+20.4～+21.4º性状：白色或近白色结晶性粉末.几乎无臭。263-264℃熔化并分解，通常较稳定，高湿度下易结块，稍着色。相对湿度60%以下时稳定【详细】 阅读：284

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    2010/8/17

    固定化的包被试剂和加入的噬菌体的滴定

    [器材和试剂]●塑料加样槽（reagentreservoirCostar）●96孔板（“非黏性”的NuncF型微孔板，或者聚丙烯微孔板）●HRP联结的抗M13抗体（Stratagene）●TMB底物试剂盒（Pierce）●2mol/L硫酸溶液●CBB●微型振荡器（Bellco）●酶标仪[方法]1．如实验方案5．1所【详细】 阅读：466

  • 发布时间

    2010/8/17

    加入的噬菌体和固定化靶标的滴定

    如果噬菌体筛选的过程在微孔板中进行，靶标蛋白固定的基本条件也就建立起来了。通过预先包被亲和素（avidin）或者抗标签的抗体之类的试剂，把靶标蛋白间接地固定到包被过的微孔板上，这样固定方法对于噬菌粒结合性检测是有益的。尽管如此，由于噬菌粒结合性检【详细】 阅读：305

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    2010/8/11

    底物噬菌体展示底物文库的构建

    在一个底物噬菌体展示实验的准备过程中，*步就是要确定用于文库展示的载体以及如何构建后继的底物文库。单价和多价的pⅢ蛋白噬菌体展示体系都可用于底物噬菌体展示。如果采用的是单价展示体系，只有一部分噬菌体颗粒的表面携带有单一的底物序列与亲和性结构域【详细】 阅读：702

  • 发布时间

    2010/8/11

    底物噬菌体筛选器材和试剂

    通常说来，底物的浓度要远远小于它们各自酶切反应的Km值和酶的浓度，并且筛选应该在基于koat/KIn值的基础上进行。然而，在同一次噬菌体展示中，合成肽段的是cat值、Km值及kcat/Km．值有很大范围的不同。对多价底物噬菌体展示的反应动力学研究表明，底物切割是【详细】 阅读：588

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    2010/8/9

    底物噬菌体展示方法的延伸以及未来的方向

    自底物噬菌体显示技术出现以来，人们对此技术进行了很多完善和修改，并应用于实际之中。在zui后，我们将对一些类似的系统进行综述，并描述其在解决一系列科研难题中的工用。1底物消减文库这是一种改良的底物噬菌体技术，用于区别两种不同蛋白酶的底物特异性。【详细】 阅读：637

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    2010/8/9

    从噬菌体展示文库中进行基于蛋白酶的筛选

    直到zui近，从噬菌体展示文库中进行的筛选都依赖于被展示蛋白质和靶标配体之间的结合。虽然从小分子到核酸及蛋白质的各种各样的靶标都已经被使用过了，但这些传统的生物淘选的方法限制了噬菌体展示技术的应用潜力。在这里，我们描述了仅仅基于蛋白质稳定性/结【详细】 阅读：628

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    2010/8/6

    具有疏水性核心的突变体的噬菌粒文库的鉴定

    使用与其他噬菌体展示方法相同的步骤来对制备出的文库的文库容量和多样性进行鉴定。为了在筛选后得到序列与结构的关系，应保证在噬菌粒文库中存在合理水平的过量，以确保在筛选步骤中所有克隆都能被取样，这一点是很重要的。我们通常力争让文库容量比理论上的【详细】 阅读：545

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    2010/8/6

    噬菌粒文库的保险性储存

    制备好DNA文库后，用标准方法将DNA电转人大肠杆菌中，得到转化株并保存，然后制备噬菌体用于分析和筛选。在液体培养基中将转化后的细胞进一步培养到对数生长期。经过在液体培养基中的增殖，一些菌液用于甘油保种，剩下的用于制备噬菌体。或者可以通过将整个转【详细】 阅读：770

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    2010/8/4

    单克隆与器官或组织的脉管系统特异性结合的建立

    在筛选和测序后，下一步是将单克隆的结合性用以下三种形式显示出来：首先，得自靶标器官的、相对于无插入序列的噬菌体及其他器官和组织而数量增加的噬菌体；其次，在器官或组织的脉管系统上进行免疫组化和免疫荧光染色时的阳性染色；第三，我们合成、注射以及【详细】 阅读：612

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    2010/8/4

    单个噬菌体插入区域PCR产物的测序

    [器材和试剂]●ABl377型测序仪●ABI的BigDye染液●ABl9700型PCR仪器●ABI蓝色葡聚糖/EDTA上样缓冲液●3mol/L的乙酸钠●95％及70％的乙醇●0．4pmol/ul的fUSE5“超级反向”引物，或T7“超级上游”引物●一台带Qiagen2X96平板转子或同等转子的Qiagen4K15C型离心【详细】 阅读：572

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    2010/8/2

    扩增来自淘洗的噬菌体群落

    [器材和试剂]●噬菌体缓冲液●XLl-Blue或者DH5。F，TB细胞●IPTG（30mg/m1储存液，水溶液；储存在-20℃）●LB-琼脂培养基+Amp/X-gal/IPTG●Luria-Bertani（LB）[L-液体培养基（1％细菌用胰蛋白胨，0，5％酵母提取物，0．085m01/LNaCl，pH7．2）]●LB+Amp（L-【详细】 阅读：762

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    2010/8/2

    利用血清筛选噬菌体文库的筛选

    [器材和试剂]●PBBST（PBS，0．1％BSA，0．1％Tween-20）●磁分离仪（Dynal）●f1Rl紫外灭活噬菌体●洗脱缓冲液（用*将0．1mol/LHCl调整到pH2．2，1mg/mlBSA）●2rn01/LTris-HClpH9．0●LB-琼脂培养基（1％细菌用胰蛋白胨，0．5％酵母提取物，1．5％细菌用琼【详细】 阅读：448

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    2010/7/30

    与噬菌体展示的多肽反应的血清抗体的亲和纯化

    [器材和试剂]●直径为60mm的聚苯乙烯培养皿（Falcon1007）●包被缓冲液●单克隆抗体（mAb）57D1。该抗体能识别M13噬菌体次要衣壳蛋白（pⅢ）N末端。它是用M13噬菌体颗粒免疫大鼠而获得的。来自含57D1杂交瘤细胞的上清用50％（NH4）2SO4沉淀，然后在PBS中溶解【详细】 阅读：1259

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    2010/7/30

    大量制备血清噬菌粒克隆

    [器材和试剂]●LB+Amp●LB+Amp/Glu[LB，50ug/mlAmp，l％葡萄糖]●IPTG●M13K07辅助噬菌体（Stratagene）●PEG8000（Sigma）●NaCl●TBS●SW40异质同晶聚合物管（Beckman）[方法]1．将含有单克隆噬菌粒的菌落接种到10ulLB+Amp/Glu中，37℃过夜培养（在lac启动【详细】 阅读：611

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    2010/7/28

    从预制的入GTll文库中制备cDNA插入片段

    [器材和试剂]通用设备及试剂●灭菌水●无菌微量离心试管●无菌移液枪及移液管枪头●微型离心机●台式离心机A部分●无菌的0．2ml的细壁聚丙烯微型离心管●pfuDNA聚合酶（Stratagene）●10×pfu缓冲液，由提供PfuDNA聚合酶的厂商提供●dNTP混合液（每个10mmol/L【详细】 阅读：630

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    2010/7/28

    用于噬菌体cDNA文库展示的载体

    互补DNA（cDNA）克隆基因的表达是基因分离与鉴定的一个极为有效的工具。用于筛选的核苷酸探针需要所感兴趣基因的原始序列信息，而对于表达cDNA文库的筛选只需要一个天然的配体或一个特异的抗体（单克隆或多克隆）作为探针。体外筛选入噬菌体或质粒展示的cDNA【详细】 阅读：567

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    2010/7/26

    gⅥ-cDNA噬菌粒文库小规模的获取和纯化

    [器材和试剂]●通用设备及试剂以及以下的设备和试剂：●无菌96孔带盖培养板（Costar）●LBAT●R408辅助噬菌体（Stratagene）●振荡孵育箱●96孔复制板●PEG/NaCl（●PBS[方法]1．将克隆体接种到100ulLBAT96孔培养板上，并在37℃过夜振荡培养（180r/min）。2．【详细】 阅读：726

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    2010/7/26

    用免疫亲和反应选择gⅥ—cDKA噬菌体文库

    [器材和试剂]●PBST●牛血清蛋白（BSA）（Sigma）●抗血清及gⅥ—cDNA噬菌体文库●无菌15ml聚丙烯管（Falcon）●立式旋转机●蛋白A—琼脂糖凝胶珠（AmershamBiosciences）●无菌0．1mol/L盐酸*，pH2．2加0．1%（w/v）BSA●无菌2mol/LTris碱（未调节pH）●于板【详细】 阅读：572

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